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缓冲液与试剂配方库:101 个配方

数据整理:药研通(Yaoyantong) · 共 101 个配方 · 数据更新于 2026-11-13

这里收录工具箱里的全部 101 个缓冲液与试剂配方,分 7 类:95 个固定配方、6 个可按 pH 与摩尔浓度调节的配方。 每份配方都给出用途、成分表(分子量、用量、浓度)、配制步骤,用量一律按 1 L 终体积标注—— 要配 500 mL 就取一半,要配 2 L 就翻倍,浓度不变。 需要按目标 pH、摩尔浓度实时换算称量质量,或按自定义体积缩放,请到 交互式计算工具箱。

怎么选:7 个常见问题

每一条的答案都能在下面找到对应的完整成分表与配制步骤;要点开实时换算,用 交互式计算工具箱。

细胞培养时洗细胞、稀释药物该用哪个缓冲液?

基础洗涤和稀释用 PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)(1X, pH 7.4),它不含钙镁离子;实验体系需要钙镁时改用 含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 PBS(D-PBS),两者的成分差异在各自成分表里逐项列出。要在培养箱外长时间操作、担心 pH 上飘,用 HEPES 缓冲液 (1 M, pH 7.5) 或 HHBS(含 HEPES 的 Hank's 缓冲液)。

pH 7.4 的磷酸盐缓冲液怎么配?

两种做法。要现成的 1× 生理用液,直接用 PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)(1X, pH 7.4),成分与用量已按 1 L 列好。要自己定 pH 或配母液,用可调配方 磷酸盐缓冲液(pH 5.8–7.4):它由七水合磷酸氢二钠与一水合磷酸二氢钠两组分构成,在工具箱里输入目标 pH 与总浓度,会算出两者各自要称多少克。

Western blot 的转膜缓冲液用哪个?

「凝胶电泳」分类下共 8 个配方,其中转膜相关的三条是 Tris-甘氨酸转移缓冲液(20x)、碳酸钠转移缓冲液(40x,pH 9.5)、电泳转移缓冲液(20x);跑胶用 SDS-PAGE SDS 电泳缓冲液(10x)。这四条都在本页给出成分表与按 1 L 标注的用量,按实际体积缩放即可。

DNA 和 RNA 操作用什么缓冲液?

溶解与保存 DNA 用 TE 缓冲液 10X,稀释成 1× 使用,其中的 EDTA 用于抑制核酸酶;琼脂糖凝胶电泳用 TAE (1 M, pH 8.6);杂交用的高盐溶液是 SSC 缓冲液(20X)(3 M, pH 7) 和 SSPE(印迹,20x,pH 7.4)。

Tris 和 Trizma 是同一个东西吗?

是。Trizma® 是 Tris(三羟甲基氨基甲烷)的商品名,同一个试剂的两种叫法。固定配比的一条是 Tris 缓冲液 (1 M, pH 7.2);要按目标 pH 现算用量,用可调配方 Trizma® 缓冲液(pH 7.0–9.2),它由 Trizma 盐酸盐与 Trizma 碱两组分构成。

想配 500 mL 而不是 1 L,用量怎么换算?

本站所有配方的用量都按 1 L 终体积标注,等比缩放即可:配 500 mL 取一半、配 2 L 翻倍,浓度不变。要按任意体积、并让每一步的称量质量自动跟着变,用工具箱里的同一份配方,把终体积改成目标值即可。

蛋白定量、染色这类生物测定用什么配方?

蛋白浓度测定(Bradford 法)用 Bradford 储备液;细胞核复染用 Mayer's 苏木素明矾染液 或 核固红溶液;荧光封片抗淬灭用 免疫荧光淬灭液;核酸凝胶染色用 溴化乙锭溶液。这些都在「生物测定」分类下,该分类共 12 个配方。

生理缓冲液 (7 个配方)

PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)(1X, pH 7.4)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液
pH
pH 7.4
浓度
1X

PBS 是一种等渗缓冲液,常用于生物学操作,如洗涤细胞、转运组织及稀释。PBS 的 pH、渗透压和离子浓度与人体液接近。由于其对细胞无毒,广泛用于细胞容器冲洗及其他可能留有残留物的制备过程。它配制简单、保质期长,但在锌离子存在下会沉淀。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.448 g136.893 mM
氯化钾74.550.2 g2.683 mM
磷酸氢二钠141.961.44 g10.144 mM
磷酸二氢钾136.090.245 g1.8 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.2 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 1.44 g 磷酸氢二钠 加入溶液
  5. 将 0.245 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  6. 将溶液调至所需 pH(通常约 7.4)。
  7. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

HBSS(Hank's 平衡盐溶液)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液

维持细胞的生理 pH 与渗透压平衡。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.448 g136.893 mM
氯化钾74.550.4 g5.366 mM
氯化钙110.980.14 g1.261 mM
七水合硫酸镁246.470.1 g405.729 μM
六水合氯化镁203.30.1 g491.884 μM
二水合磷酸氢二钠177.990.06 g337.098 μM
磷酸二氢钾136.090.06 g440.885 μM
D-葡萄糖(右旋糖)180.161 g5.551 mM
碳酸氢钠84.010.35 g4.166 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.4 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.14 g 氯化钙 加入溶液
  5. 将 0.1 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  6. 将 0.1 g 六水合氯化镁 加入溶液
  7. 将 0.06 g 二水合磷酸氢二钠 加入溶液
  8. 将 0.06 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  9. 将 1 g D-葡萄糖(右旋糖) 加入溶液
  10. 将 0.35 g 碳酸氢钠 加入溶液
  11. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

HHBS(含 HEPES 的 Hank's 缓冲液)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液

HHBS 是一种通用缓冲液,结合了 Hank's 缓冲液的稳定性与 HEPES 缓冲液(Good 氏 缓冲液之一)良好的缓冲能力。HHBS 广泛用于细胞培养,但对光敏感。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钙110.980.14 g1.261 mM
六水合氯化镁203.30.1 g491.884 μM
七水合硫酸镁246.470.1 g405.729 μM
氯化钾74.550.4 g5.366 mM
磷酸二氢钾136.090.06 g440.885 μM
碳酸氢钠84.010.35 g4.166 mM
氯化钠58.448 g136.893 mM
磷酸氢二钠141.960.048 g338.123 μM
D-葡萄糖(右旋糖)180.161 g5.551 mM
HEPES238.34.76 g19.975 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.14 g 氯化钙 加入溶液
  3. 将 0.1 g 六水合氯化镁 加入溶液
  4. 将 0.1 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  5. 将 0.4 g 氯化钾 加入溶液
  6. 将 0.06 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  7. 将 0.35 g 碳酸氢钠 加入溶液
  8. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  9. 将 0.048 g 磷酸氢二钠 加入溶液
  10. 将 1 g D-葡萄糖(右旋糖) 加入溶液
  11. 将 4.76 g HEPES 加入溶液
  12. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

HEPES 缓冲液 (1 M, pH 7.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液
pH
pH 7.5
浓度
1 M

HEPES 缓冲液是 Good 氏 两性离子缓冲液之一,pH 范围 6.8–8.2。常用于细胞培养基,因其 pH 在二氧化碳浓度变化时能保持良好稳定。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
HEPES238.3238.3 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 238.3 g HEPES 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 PBS(D-PBS)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液

含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 DPBS(Dulbecco's 磷酸盐缓冲盐水)广泛用于试剂配制与转运介质,以及洗涤和稀释。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钙110.980.1 g901.063 μM
氯化钾74.550.2 g2.683 mM
六水合氯化镁203.30.1 g491.884 μM
氯化钠58.448 g136.893 mM
磷酸氢二钠141.962.16 g15.216 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.1 g 氯化钙 加入溶液
  3. 将 0.2 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.1 g 六水合氯化镁 加入溶液
  5. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  6. 将 2.16 g 磷酸氢二钠 加入溶液
  7. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  8. 过滤除菌。25°C 下可保存长达 12 个月。

细胞外生理盐水(1x,pH 7.3)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液
pH
pH 7.3
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.448.182 g140.007 mM
氯化钾74.550.402 g5.392 mM
氯化钙110.980.294 g2.649 mM
硫酸镁120.371.204 g10.002 mM
HEPES238.31.191 g4.998 mM
葡萄糖180.161.802 g10.002 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 8.182 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.402 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.294 g 氯化钙 加入溶液
  5. 将 1.204 g 硫酸镁 加入溶液
  6. 将 1.191 g HEPES 加入溶液
  7. 将 1.802 g 葡萄糖 加入溶液
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

Tyrode 液(酸性)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生理缓冲液
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.448 g136.893 mM
氯化钾74.550.2 g2.683 mM
二水合氯化钙147.010.24 g1.633 mM
六水合氯化镁203.30.1 g491.884 μM
葡萄糖180.161 g5.551 mM
聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)400004 g100 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.2 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.24 g 二水合氯化钙 加入溶液
  5. 将 0.1 g 六水合氯化镁 加入溶液
  6. 将 1 g 葡萄糖 加入溶液
  7. 将 4 g 聚乙烯吡咯烷酮 (PVP) 加入溶液
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. 于室温配制,用 Analar 盐酸(BDH)将 pH 调至 2.5。加入 PVP 以增加黏度并降低胚胎黏附性。过滤除菌,分装于 -20°C 保存。

pH 缓冲 (48 个配方)

柠檬酸缓冲液(pH 3.0–6.2)

可调配方 · 用量随目标 pH 变化 · 用上方计算器按目标 pH 与摩尔浓度求值

分类
pH 缓冲
pH
pH 3.0–6.2

柠檬酸缓冲液可用于 RNA 分离,因其能防止碱基水解。该缓冲液也用于抗原检测,通过破坏抗原与其固定介质中任何物质之间的交联。柠檬酸缓冲液是免疫荧光染色应用的常用选择,因为它可在不增加背景信号的情况下增强染色强度。它在生物学研究和临床应用中广受欢迎,包括病理学,并在医学领域作用日益增加,因其可轻度提高透析效率。室温下保质期可达 3 个月。

组分分子量 (g/mol)用量浓度
二水合柠檬酸钠294.1按目标 pH 计算随 pH 变化
柠檬酸192.12按目标 pH 计算随 pH 变化
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 二水合柠檬酸钠 加入溶液
  3. 将 柠檬酸 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

乙酸缓冲液(pH 3.6–5.6)

可调配方 · 用量随目标 pH 变化 · 用上方计算器按目标 pH 与摩尔浓度求值

分类
pH 缓冲
pH
pH 3.6–5.6

乙酸钠缓冲液用于核酸的纯化和沉淀,以及蛋白质结晶和蛋白电泳用染色凝胶。它在血液学中非常流行,因为有证据表明乙酸缓冲输液显示出更好的稳定性。乙酸缓冲液价格低廉、配制简单,可室温保存。

组分分子量 (g/mol)用量浓度
乙酸钠82.03按目标 pH 计算随 pH 变化
乙酸60.05按目标 pH 计算随 pH 变化
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 乙酸钠 加入溶液
  3. 将 乙酸 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

Tris 缓冲液 (1 M, pH 7.2)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.2
浓度
1 M

Tricine 由氨基酸 tris 和甘氨酸衍生而来。它是两性离子和羟基自由基清除剂,广泛用于小分子蛋白质的 SDS-PAGE。Tricine 缓冲液也常用于电泳。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris 碱121.14121.14 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 121.14 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  3. 用 盐酸 将溶液调至所需 pH(通常约 7.0)。
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

柠檬酸缓冲液 (0.1 M, pH 6.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.0
浓度
0.1 M

柠檬酸缓冲液可用于 RNA 分离,因其能防止碱基水解。它也用于抗原检测,通过破坏抗原与其固定介质中任何物质之间的交联。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
二水合柠檬酸钠294.124.269 g82.52 mM
柠檬酸192.123.358 g17.479 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 24.269 g 二水合柠檬酸钠 加入溶液
  3. 将 3.358 g 柠檬酸 加入溶液
  4. 用 0.1N 盐酸 将溶液调至所需 pH(通常约 6.0)。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

乙酸缓冲液 (0.1 M, pH 5.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.0
浓度
0.1 M

乙酸钠缓冲液用于核酸的纯化和沉淀,以及蛋白质结晶和蛋白电泳用染色凝胶。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
乙酸钠82.035.772 g70.365 mM
乙酸60.051.778 g29.609 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 5.772 g 乙酸钠 加入溶液
  3. 将 1.778 g 乙酸 加入溶液
  4. 用 10N 盐酸 将溶液调至所需 pH(通常约 5.0)。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

磷酸盐缓冲液(pH 5.8–7.4)

可调配方 · 用量随目标 pH 变化 · 用上方计算器按目标 pH 与摩尔浓度求值

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.8–7.4

简单的磷酸盐缓冲液在生物学实验中无处不在,因为它可适应多种 pH 水平,包括等渗。这种宽泛的范围源于磷酸具有 3 个解离常数(化学上称为三元酸),可在 2.15、7.21 或 12.32 附近的各个 pH 水平配制缓冲液。磷酸盐缓冲液高度溶于水且缓冲容量高,但会抑制酶活性并在乙醇中沉淀。它是最常用的缓冲液之一,常用于分子与细胞生物学、化学及材料科学等诸多领域。

组分分子量 (g/mol)用量浓度
七水合磷酸氢二钠268.07按目标 pH 计算随 pH 变化
一水合磷酸二氢钠137.99按目标 pH 计算随 pH 变化
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 七水合磷酸氢二钠 加入溶液
  3. 将 一水合磷酸二氢钠 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

盐酸-氯化钾缓冲液 (0.1 M, pH 2.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 2.0
浓度
0.1 M

这种常用缓冲液用于多个生物学研究领域,常用于酶法或组织化学用途。理想情况下应在使用前不久配制,因其不易保存。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钾74.557.45 g99.933 mM
盐酸36.460.772 g21.174 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 7.45 g 氯化钾 加入溶液
  3. 将 0.772 g 盐酸 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

甘氨酸-盐酸缓冲液 (0.1 M, pH 3.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 3.0
浓度
0.1 M

这种低 pH 缓冲液广泛用于亲和色谱,特别是蛋白质和抗体。它也用于细胞培养和其他生物学应用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
甘氨酸75.077.5 g99.907 mM
盐酸36.460.832 g22.82 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 7.5 g 甘氨酸 加入溶液
  3. 将 0.832 g 盐酸 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

柠檬酸-磷酸盐缓冲液 (0.15 M, pH 5.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.0
浓度
0.15 M

一种传统缓冲液,最初于 1921 年提出。由于柠檬酸-磷酸盐缓冲液(又称 McIlvaine 缓冲液)仅含 2 种成分,其配方可调节至 3–8 的 pH 范围。它用于细胞生物学、分子生物学和血液学等多种应用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
二水合磷酸氢二钠177.9918.15 g101.972 mM
柠檬酸192.129.605 g49.995 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 18.15 g 二水合磷酸氢二钠 加入溶液
  3. 将 9.605 g 柠檬酸 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

甘氨酸-氢氧化钠缓冲液 (0.08 M, pH 10)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 10
浓度
0.08 M

一种缓冲能力良好的常用缓冲液,常用于细胞生物学。由于甘氨酸氨基在较高 pH 下的构型,该缓冲液会轻微抑制碱性磷酸酶活性。因此建议与该缓冲液配合使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
甘氨酸75.076.01 g80.059 mM
氢氧化钠402.05 g51.25 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 6.01 g 甘氨酸 加入溶液
  3. 将 2.05 g 氢氧化钠 加入溶液
  4. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

EBSS(含镁、钙、酚红)(pH 7.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.0

EBSS 是 Earle's 平衡盐溶液的缩写,常用于细胞培养操作,包括 CO2 环境下的洗涤和稀释。加入镁离子和钙离子以及酚红,是为了辅助试剂配制。酚红是一种弱雌激素,不应与有应答的细胞培养长期共用。其他含酚红的缓冲液请点击此处。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钙110.980.2 g1.802 mM
七水合硫酸镁246.470.2 g811.458 μM
氯化钾74.550.4 g5.366 mM
碳酸氢钠84.012.2 g26.187 mM
氯化钠58.446.8 g116.359 mM
一水合磷酸二氢钠137.990.14 g1.015 mM
D-葡萄糖(右旋糖)180.161 g5.551 mM
酚红354.380.01 g28.218 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.2 g 氯化钙 加入溶液
  3. 将 0.2 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  4. 将 0.4 g 氯化钾 加入溶液
  5. 将 2.2 g 碳酸氢钠 加入溶液
  6. 将 6.8 g 氯化钠 加入溶液
  7. 将 0.14 g 一水合磷酸二氢钠 加入溶液
  8. 将 1 g D-葡萄糖(右旋糖) 加入溶液
  9. 将 0.01 g 酚红 加入溶液
  10. 使用 盐酸 或 氢氧化钠 将溶液调至最终所需 pH。
  11. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

咪唑-盐酸缓冲液 (0.05 M, pH 7.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.0
浓度
0.05 M

咪唑是一种温和的缓冲液,适用于生物化学和分子生物学等多个研究领域的 IHC 应用。它保质期良好,且被多种细胞类型所耐受。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
咪唑68.083.404 g50 mM
盐酸36.460.886 g24.301 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 3.404 g 咪唑 加入溶液
  3. 将 0.886 g 盐酸 加入溶液
  4. 用 盐酸 将溶液调至所需 pH(通常约 7.0)。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

Trizma® 缓冲液(pH 7.0–9.2)

可调配方 · 用量随目标 pH 变化 · 用上方计算器按目标 pH 与摩尔浓度求值

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.0–9.2

Trizma® 是一种专有化学缓冲液,用途类似 Tris 缓冲液。它常用于多种 IHC 检测的蛋白质提取以及印迹应用。它在夹心 ELISA 方案中用于保护抗体,也用于核酸电泳。

组分分子量 (g/mol)用量浓度
Trizma 盐酸盐157.6按目标 pH 计算随 pH 变化
Trizma 碱121.14按目标 pH 计算随 pH 变化
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐 (Trizma 盐酸) 加入溶液
  3. 将 三(羟甲基)氨基甲烷 (Trizma 碱) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

MES (0.5 M, pH 6)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6
浓度
0.5 M

MES 缓冲液是一种 Good 氏 缓冲液,在化学和酶学上都非常稳定。其紫外吸收极小,常作为 bis-tris 凝胶的电泳缓冲液。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
MES (游离酸)195.2497.62 g500 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 97.62 g MES 游离酸 (2-(N-吗啉基)乙磺酸) 加入溶液
  3. 0.5 M MES 溶液的起始 pH 为 3.23。配制 1 L 0.5 M MES 需用 13.6 mL 10N 氢氧化钠 将 pH 调至 6.0。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

Bis-Tris 缓冲液 (1 M, pH 6.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.5
浓度
1 M

Bis-Tris 缓冲液用于涉及蛋白质和核酸的分子生物学应用。与 tris 缓冲液类似,它具有良好的缓冲容量,可室温保存。Bis-Tris 与多种金属离子(包括 Cu 和 Pb)发生相互作用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Bis-Tris209.24209.24 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 209.24 g Bis-Tris (双(2-羟乙基)氨基三(羟甲基)甲烷) 加入溶液
  3. 不加 盐酸 时起始 pH 为 9.90。用浓 盐酸 调节 pH。使用前或保存前过滤除菌或高压灭菌。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

ADA 缓冲液 (0.5 M, pH 6.6)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.6
浓度
0.5 M

ADA 缓冲液是 Good 氏 缓冲液之一,pH 范围 6.0–7.2。常用于细胞培养基,作为 H+、Ca2+ 和 Mg2+ 的螯合剂。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
ADA190.1595.11 g500.184 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 95.11 g ADA (N-(2-乙酰胺基)-2-亚氨基二乙酸) 加入溶液
  3. 加入 dH2O 至体积为 1 L。
  4. 在 pH 升高之前 ADA 不会完全溶解。用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。

ACES 缓冲液 (0.1 M, pH 6.7)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.7
浓度
0.1 M

ACES 缓冲液是 Good 氏 两性离子缓冲液之一,pH 范围 6.1–7.2。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
ACES182.218.22 g100 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 18.22 g ACES (N-(2-乙酰胺基)-2-氨基乙磺酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

PIPES 缓冲液 (1 M, pH 6.8)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.8
浓度
1 M

PIPES 缓冲液是 Good 氏 两性离子缓冲液之一,pH 范围 6.1–7.5。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
PIPES302.37302.37 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 302.37 g PIPES (哌嗪-N,N'-双(2-乙磺酸)) 加入溶液
  3. PIPES 游离酸在酸性范围内溶解度低。用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

MOPSO 缓冲液 (0.5 M, pH 6.9)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.9
浓度
0.5 M

MOPSO 缓冲液是 Good 氏 两性离子缓冲液之一,近似 pH 范围 6.5–7.9。它缓冲容量良好,但会与铁离子反应。MOPSO 用于多种需要生理 pH 的测定。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
MOPSO (游离酸)225.26112.63 g500 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 112.63 g MOPSO 游离酸 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

BES 缓冲盐水(2X)(0.05 M, pH 6.95)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.95
浓度
2X

BES 缓冲盐水常用于哺乳动物细胞的磷酸钙介导转化。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
BES213.2510.66 g49.988 mM
氯化钠58.4416.36 g279.945 mM
磷酸氢二钠141.960.21 g1.479 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 10.66 g BES (N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸) 加入溶液
  3. 将 16.36 g 氯化钠 加入溶液
  4. 将 0.21 g 磷酸氢二钠 加入溶液
  5. 用 1M 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH(典型 pH = 6.95)。
  6. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

TES 缓冲液 (1 M, pH 7.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.5
浓度
1 M

TES 缓冲液是 Good 氏 两性离子缓冲液之一,pH 范围 6.8–8.2。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
TES229.25229.25 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 229.25 g TES (N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

MOPS 缓冲液(10X)(0.2 M, pH 7)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7
浓度
10X

MOPS 缓冲液常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
MOPS (游离酸)209.2641.86 g200.038 mM
乙酸钠82.034.1 g49.982 mM
EDTA 二钠372.243.72 g9.994 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 41.86 g MOPS 游离酸 (3-(N-吗啉基)丙磺酸) 加入溶液
  3. 将 4.1 g 乙酸钠 加入溶液
  4. 将 3.72 g EDTA 二钠 加入溶液
  5. 用 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH(典型 pH = 7)。
  6. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

SSC 缓冲液(20X)(3 M, pH 7)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7
浓度
20X

生理盐水-柠檬酸钠(SSC)缓冲液常用作 DNA 和 RNA 的杂交缓冲液,尤其用于 Northern 和 Southern 印迹。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.44175.3 g3 M
柠檬酸钠294.188.3 g300.238 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 175.3 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 88.3 g 柠檬酸钠 加入溶液
  4. 用 14 N 盐酸 将溶液调至所需 pH(通常 7.0)。
  5. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

TBS (1 M, pH 7.4)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.4
浓度
1 M

Tris 缓冲盐水(TBS)是一种常用的等渗缓冲液,用于多种应用,包括各类免疫检测的洗涤缓冲液。它是抗体配制的默认缓冲液之一。其他抗体配制材料请点击此处。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.448 g136.893 mM
氯化钾74.550.2 g2.683 mM
Tris 碱121.143 g24.765 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.2 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 3 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  5. 用 盐酸 将溶液调至所需 pH(通常 7.4)。
  6. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

Bicine (1 M, pH 8.26)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 8.26
浓度
1 M

Bicine 用于肽和蛋白质的生化应用,特别适合低温。Bicine 是一种两性离子化合物,又称偶极离子。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Bicine163.17163.17 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 163.17 g Bicine (N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

Tricine (1 M, pH 8.05)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 8.05
浓度
1 M

Tricine 由氨基酸 tris 和甘氨酸衍生而来。它是两性离子和羟基自由基清除剂,广泛用于小分子蛋白质的 SDS-PAGE。Tricine 缓冲液也常用于电泳。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tricine179.17179.17 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 179.17 g Tricine (N-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

TAE (1 M, pH 8.6)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 8.6
浓度
1 M

TAE 缓冲液常用于核酸的琼脂糖电泳应用。相关凝胶电泳荧光探针请点击此处。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris 碱121.14242 g1.998 M
EDTA 二钠372.2418.61 g49.995 mM
乙酸60.0559.955 g998.418 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 242 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  3. 将 18.61 g EDTA 二钠 加入溶液
  4. 将 59.955 g 乙酸 加入溶液
  5. 1x TAE 溶液为 40 mM Tris、20 mM 乙酸盐和 1 mM EDTA,通常 pH 约为 8.6(无需调节)。
  6. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

CAPS (0.5 M, pH 10.4)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 10.4
浓度
0.5 M

CAPS 常用于 Western Blot 应用及其他蛋白质分选流程。该缓冲液极高的 pH 使其可用于鉴定和测序具有高等电点(pI 或 IEP)的肽和蛋白质。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
CAPS221.32110.66 g500 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 110.66 g CAPS (3-(环己氨基)-1-丙磺酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

HEPPSO (1 M, pH 7.85)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.85
浓度
1 M

HEPPSO 是一种 Good 氏 缓冲液,用于生物学研究中的蛋白质分离。它是一种两性离子化合物,与铜离子结合力强。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
HEPPSO286.349268.33 g937.073 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 268.33 g HEPPSO (4-(2-羟乙基)-1-哌嗪丙磺酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

CHES (0.5 M, pH 9.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 9.5
浓度
0.5 M

CHES 是一种两性离子,用于高达 10 的相对较高 pH。它用于多个生物学研究领域,包括酶学,在研究高于生理 pH 范围的反应时很有用。常用于电泳,与大多数金属离子反应性低。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
CHES207.29103.65 g500.024 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 103.65 g CHES (2-(环己氨基)乙磺酸) 加入溶液
  3. 用 10N 氢氧化钠 将溶液调至所需 pH。
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

磷酸钾缓冲液(pH 5.8–8.0)

可调配方 · 用量随目标 pH 变化 · 用上方计算器按目标 pH 与摩尔浓度求值

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.8–8.0

磷酸钾缓冲液,有时称为 Gomori 缓冲液,由磷酸二氢钾(单碱)和磷酸氢二钾(双碱)的混合物组成。这些缓冲液缓冲容量极佳且高度溶于水。然而,磷酸钾缓冲液会与某些金属离子(包括钙和镁)反应并抑制酶反应。此外,所有磷酸盐在乙醇中都会沉淀,这可能对通常使用乙醇溶液的某些核酸制备产生不利影响。磷酸钾缓冲液因其适应性强且经济,用于从分子生物学到植物学的研究领域。

组分分子量 (g/mol)用量浓度
磷酸氢二钾174.18按目标 pH 计算随 pH 变化
磷酸二氢钾136.09按目标 pH 计算随 pH 变化
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 磷酸氢二钾 加入溶液
  3. 将 磷酸二氢钾 加入溶液
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

二乙醇胺 (1 M, pH 9.8)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 9.8
浓度
1 M

二乙醇胺(DEA)是采用浓缩 Tropix 底物检测碱性磷酸酶应用的首选缓冲液。与大多数缓冲体系相比,DEA 缓冲液具有更有利的反应动力学和更高的灵敏度。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
二乙醇胺105.14105.14 g1 M
六水合氯化镁203.30.1 g491.884 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 105.14 g 二乙醇胺 加入溶液
  3. 将 0.1 g 六水合氯化镁 加入溶液
  4. 用 10 M 盐酸 溶液将 pH 调至 9.8。
  5. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

硼酸钠缓冲液 (1 M, pH 8.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 8.5
浓度
1 M

硼酸钠缓冲液是一种用于将 pH 维持在相对较窄范围内的缓冲液。它是等渗的,具有强杀菌作用,可用于稀释物质或包被过程。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
硼酸 (H₃BO₃)61.8361.83 g1 M
氢氧化钠4010 g250 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 61.83 g 硼酸 (H3BO3) 加入溶液
  3. 将 10 g 氢氧化钠 加入溶液
  4. 加入 dH2O 至体积为 1 L。

马来酸缓冲液 (1 M, pH 7.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.5
浓度
1 M

马来酸缓冲液常用于 Southern 印迹制备,以及涉及核酸的多种应用中的洗涤缓冲液。保质期为 6 个月至 1 年。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
马来酸116.07116.1 g1 M
氯化钠58.4487.6 g1.499 M
氢氧化钠4040 g1 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL dH2O。
  2. 将 116.1 g 马来酸 加入溶液
  3. 将 87.6 g 氯化钠 加入溶液
  4. 将 40 g 氢氧化钠 加入溶液
  5. 加入 dH2O 至体积为 1 L。
  6. 于 15 psi 下高压灭菌 20 分钟,或过滤除菌。室温保存。用于洗涤时,如需可加入 0.2% Tween-20。

Tris 缓冲盐水(TBS,0.1 M)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲

Tris 缓冲盐水(TBS)常用于多种应用中的洗涤,如细胞培养、IHC、WB 和 ELISA。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.448 g136.893 mM
氯化钾74.550.2 g2.683 mM
Tris121.1412.1 g99.884 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.2 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 12.1 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris) 加入溶液
  5. 用 盐酸 将 pH 调至 7.4。
  6. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

硫酸铵(饱和)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲

硫酸铵常用于蛋白质沉淀和分级分离,因其可增强疏水相互作用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
硫酸铵132.14761 g5.759 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 761 g 硫酸铵 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 搅拌并温和加热溶解。冷却至室温,将 pH 调至 7(用 NH4OH 或 盐酸 等酸)。若需长期保存,经 0.2-µm 滤膜过滤除菌,4°C 保存。

磷酸钾缓冲液 (1 M, pH 6.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 6.5
浓度
1 M

磷酸钾缓冲液,有时称为 Gomori 缓冲液,由磷酸二氢钾(单碱)和磷酸氢二钾(双碱)的混合物组成。这些缓冲液缓冲容量极佳且高度溶于水。然而,磷酸钾缓冲液会与某些金属离子(包括钙和镁)反应并抑制酶反应。此外,所有磷酸盐在乙醇中都会沉淀,这可能对通常使用乙醇溶液的某些核酸制备产生不利影响。磷酸钾缓冲液因其适应性强且经济,用于从分子生物学到植物学的研究领域。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
磷酸二氢钾136.0995 g698.067 mM
磷酸氢二钾174.1852.5 g301.412 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 95 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  3. 将 52.5 g 磷酸氢二钾 加入溶液
  4. 将 pH 调至 6.5。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  6. 过滤除菌,室温保存。

柠檬酸-磷酸盐缓冲液 (110 mM, pH 5.6)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.6
浓度
110 mM

一种传统缓冲液,最初于 1921 年提出。由于柠檬酸-磷酸盐缓冲液(又称 McIlvaine 缓冲液)仅含 2 种成分,其配方可调节至 3–8 的 pH 范围。它用于细胞生物学、分子生物学和血液学等多种应用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
无水磷酸氢二钠141.967.1 g50.014 mM
柠檬酸192.1211.5 g59.858 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 7.1 g 无水磷酸氢二钠 加入溶液
  3. 将 11.5 g 柠檬酸 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 高压灭菌。(最终溶液含 50 mM Na2HPO4。)

柠檬酸-磷酸盐缓冲液 (40 mM, pH 5.6)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.6
浓度
40 mM

一种传统缓冲液,最初于 1921 年提出。由于柠檬酸-磷酸盐缓冲液(又称 McIlvaine 缓冲液)仅含 2 种成分,其配方可调节至 3–8 的 pH 范围。它用于细胞生物学、分子生物学和血液学等多种应用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
无水磷酸氢二钠141.962.82 g19.865 mM
柠檬酸192.124.2 g21.861 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 2.82 g 无水磷酸氢二钠 加入溶液
  3. 将 4.2 g 柠檬酸 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 高压灭菌。(最终溶液含 20 mM Na2HPO4。)

磷酸钠溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
磷酸氢二钠141.9670 g493.097 mM
一水合磷酸二氢钠137.9930 g217.407 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 70 g 磷酸氢二钠 加入溶液
  3. 将 30 g 一水合磷酸二氢钠 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 高压灭菌,室温保存。

乙酸钠 (3 M, pH 5.2)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 5.2
浓度
3 M

乙酸钠 (3 M) 常用于 DNA 和 RNA 提取。乙酸钠是一种盐,有助于核酸沉淀。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
乙酸钠82.03246.1 g3 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 246.1 g 乙酸钠 加入溶液
  3. 用冰乙酸将 pH 调至 5.2。使溶液冷却过夜。再用冰乙酸将 pH 再次调至 5.2。
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 过滤除菌。

TB 缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
EDTA292.240.37 g1.266 mM
氯化钾74.5513.64 g182.964 mM
氯化钠58.442.74 g46.886 mM
苯甲基磺酰氟 (PMSF)174.190.17 g975.946 μM
Tris 盐酸盐157.61.21 g7.678 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.37 g EDTA (乙二胺四乙酸) 加入溶液
  3. 将 13.64 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 2.74 g 氯化钠 加入溶液
  5. 将 0.17 g 苯甲基磺酰氟 (PMSF) 加入溶液
  6. 将 1.21 g 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐 (Tris-HCl) 加入溶液
  7. 将 pH 调至 6.8。
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. 过滤除菌。

Tris-柠檬酸缓冲液(pH 8.0)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 8.0

Tris-柠檬酸缓冲液可用于细菌酶的电泳。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
柠檬酸192.1216 g83.281 mM
Tris121.1440.2 g331.847 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 16 g 柠檬酸 加入溶液
  3. 将 40.2 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

硼酸盐缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲

硼酸盐缓冲液是一种应用广泛的缓冲液。含氯化钠的硼酸盐缓冲液已用于腐蚀研究。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
硼酸61.836.185 g100.032 mM
氯化钠58.444.385 g75.034 mM
四硼酸钠201.225.0305 g25 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 6.185 g 硼酸 加入溶液
  3. 将 4.385 g 氯化钠 加入溶液
  4. 将 5.0305 g 四硼酸钠 加入溶液
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  6. 使用磁棒和低温加热确保硼酸完全溶解。用 0.22-µm 滤器真空过滤除菌。将 pH 调至 8.4。

甘氨酸 (0.1 M, pH 2.2)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 2.2
浓度
0.1 M

甘氨酸是一种填充剂,有助于促进蛋白质稳定性。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
甘氨酸 (Sigma G7126)75.077.5 g99.907 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 7.5 g 甘氨酸 (Sigma G7126) 加入溶液
  3. 用 盐酸 将 pH 调至 2.2。
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 高压灭菌。

碳酸氢铵 (50 mM, pH 7.8)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲
pH
pH 7.8
浓度
50 mM
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
碳酸氢铵79.064 g50.594 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 4 g 碳酸氢铵 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

乙酸铵

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
pH 缓冲

乙酸铵广泛用于分子生物学应用,如蛋白质纯化和沉淀。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
乙酸铵77.08770 g9.99 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 770 g 乙酸铵 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 经 0.22-µm 滤器过滤除菌。将溶液置于密封良好的瓶中,4°C 或室温保存。乙酸铵在热水中会分解,含它的溶液不应高压灭菌。

碳酸-碳酸氢盐缓冲液(pH 9.2–10.6)

可调配方 · 用量随目标 pH 变化 · 用上方计算器按目标 pH 与摩尔浓度求值

分类
pH 缓冲
pH
pH 9.2–10.6

常用于多种免疫检测应用以及许多蛋白质和抗体偶联流程,包括需要实验表面包被的夹心 ELISA。碳酸-碳酸氢盐缓冲液广泛用于分子与细胞生物学、生物化学及医学领域,是小肠最常用的缓冲液。它缓冲容量良好、易于配制、保质期优异。

组分分子量 (g/mol)用量浓度
碳酸氢钠84.01按目标 pH 计算随 pH 变化
无水碳酸钠105.99按目标 pH 计算随 pH 变化
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 碳酸氢钠 加入溶液
  3. 将 无水碳酸钠 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

样品制备 (13 个配方)

TE 缓冲液 10X

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

TE 缓冲液用作防止 DNA 和 RNA 降解的保护措施,储存这两种分子并维持适当的 pH 水平。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris-Cl (目标 pH)157.59415.759 g99.997 mM
EDTA (pH 8)292.242.92 g9.992 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 15.759 g 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐 (Tris-Cl,按需调节 pH) 加入溶液
  3. 将 2.92 g EDTA (pH 8) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

洗脱缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

洗脱缓冲液常用于许多应用,如亲和色谱、免疫沉淀、蛋白质纯化和 DNA 提取,用于从配体或膜上洗脱蛋白质或 DNA。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.4423.38 g400.068 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 23.38 g 氯化钠 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 将溶液经硝酸纤维素滤膜(0.45-μM 孔径)过滤,室温保存。

BAC DNA 显微注射缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

BAC 注射缓冲液用于在显微注射前稳定 BAC DNA。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris (pH 7.5)121.141.211 g9.997 mM
EDTA292.240.02922 g99.986 μM
氯化钠58.445.844 g100 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1.211 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris,pH 7.5) 加入溶液
  3. 将 0.02922 g EDTA (乙二胺四乙酸) 加入溶液
  4. 将 5.844 g 氯化钠 加入溶液
  5. 将 pH 调至 7.4。
  6. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  7. 将注射用缓冲液(经 0.2-U 滤器)过滤,4°C 保存。

EDTA 溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

金属剥离溶液由 EDTA 组成,EDTA 可作为金属螯合剂。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
EDTA292.2411.7 g40.036 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 11.7 g EDTA (乙二胺四乙酸) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 用 2 M 氢氧化钠 缓慢将 pH 调至 8.0。(除非使用盐形式,EDTA 通常需要较长时间和碱性 pH 条件才能完全溶解。)4°C 下可保存长达 3 个月。

ACK 裂解缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

ACK 裂解缓冲液用于裂解红细胞。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化铵53.498.02 g149.935 mM
碳酸氢钾100.121 g9.988 mM
EDTA 二钠372.240.0372 g99.936 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 8.02 g 氯化铵 加入溶液
  3. 将 1 g 碳酸氢钾 加入溶液
  4. 将 0.0372 g EDTA 二钠 加入溶液
  5. 将 pH 调至 7.2–7.4。
  6. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  7. 室温下可保存长达 6 个月。

多聚甲醛溶液(8%)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

多聚甲醛溶液常用于固定细胞或组织。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
多聚甲醛30.0380 g2.664 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 80 g 多聚甲醛 加入溶液
  3. 加热至 60°C,加入 2–3 滴 1 N 氢氧化钠。
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 该储备液 4°C 保存。

Gey's 平衡盐溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

Gey's 平衡盐溶液可用于细胞悬液或作为洗涤液。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
二水合氯化钙147.010.22 g1.496 mM
氯化钾74.550.37 g4.963 mM
磷酸二氢钾136.090.03 g220.442 μM
六水合氯化镁203.30.21 g1.033 mM
七水合硫酸镁246.470.07 g284.01 μM
氯化钠58.448 g136.893 mM
碳酸氢钠84.010.227 g2.702 mM
磷酸氢二钠141.960.12 g845.309 μM
D-葡萄糖180.161 g5.551 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.22 g 二水合氯化钙 加入溶液
  3. 将 0.37 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.03 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  5. 将 0.21 g 六水合氯化镁 加入溶液
  6. 将 0.07 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  7. 将 8 g 氯化钠 加入溶液
  8. 将 0.227 g 碳酸氢钠 加入溶液
  9. 将 0.12 g 磷酸氢二钠 加入溶液
  10. 将 1 g D-葡萄糖 加入溶液
  11. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  12. 无菌过滤,分装为 500-mL 等份,4°C 保存。

裂解溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.44146.1 g2.5 M
EDTA 二钠372.2437.2 g99.936 mM
Tris 碱121.141.2 g9.906 mM
氢氧化钠408 g200 mM
N-月桂酰肌氨酸钠盐293.3810 g34.085 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 146.1 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 37.2 g EDTA 二钠 加入溶液
  4. 将 1.2 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  5. 将 8 g 氢氧化钠 加入溶液
  6. 将 10 g N-月桂酰肌氨酸钠 加入溶液
  7. 将 pH 调至 10。
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. 室温保存。

H-50 缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

H-50 缓冲液常用于洗涤和重悬细胞。它含有 HEPES,是 Good 氏 两性离子缓冲液之一。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
HEPES238.34.76 g19.975 mM
氯化钾74.553.73 g50.034 mM
硫酸镁120.370.12 g996.926 μM
氯化钠58.440.58 g9.925 mM
碳酸氢钠84.010.42 g4.999 mM
一水合磷酸二氢钠156.010.156 g999.936 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 4.76 g HEPES 加入溶液
  3. 将 3.73 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.12 g 硫酸镁 加入溶液
  5. 将 0.58 g 氯化钠 加入溶液
  6. 将 0.42 g 碳酸氢钠 加入溶液
  7. 将 0.156 g 二水合磷酸二氢钠 加入溶液
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. 视情况用 盐酸 或 氢氧化钠 将 pH 调至 7.0。高压灭菌,冷藏或冷冻保存。

碱性硫代硫酸钠

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
硫代硫酸钠158.11200 g1.265 M
氢氧化钠404 g100 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 200 g 硫代硫酸钠 加入溶液
  3. 将 4 g 氢氧化钠 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

四氧化锇溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

四氧化锇溶液用作电子显微镜中的固定剂。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
四氧化锇254.2340 g157.338 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 40 g 四氧化锇 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 确保瓶盖拧紧密封。用铝箔包裹,将瓶子置于更大的、旋盖密封的容器中。使四氧化锇在 4°C 下溶解 2–3 天。使用前用双蒸水按 1:5 稀释。四氧化锇溶液可于 -20°C 保存长达 6 个月。

DEAE-葡聚糖

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

于 15 psi(1.05 kg/cm²)液体循环下高压灭菌 20 分钟。高压灭菌也有助于聚合物溶解。最初用于转染的 DEAE-葡聚糖分子量为 >2×10⁶。尽管该材料已不再商业供应,仍偶尔可在化学试剂库中见到。较早批次、分子量较高的 DEAE-葡聚糖比目前可得的低分子量聚合物转染效率更高。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
DEAE-葡聚糖50000050 g100 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 50 g DEAE-葡聚糖 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 于 15 psi(1.05 kg/cm²)液体循环下高压灭菌 20 分钟。高压灭菌也有助于聚合物溶解。最初用于转染的 DEAE-葡聚糖分子量为 >2×10⁶。尽管该材料已不再商业供应,仍偶尔可在化学试剂库中见到。较早批次、分子量较高的 DEAE-葡聚糖比目前可得的低分子量聚合物转染效率更高。

三氯乙酸(TCA)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
样品制备

TCA(三氯乙酸)用于蛋白质和 DNA 沉淀。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
三氯乙酸 (TCA)163.391101.32 g6.74 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1101.32 g 三氯乙酸 (TCA) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 所得溶液含 100% (w/v) TCA。

生物测定 (12 个配方)

Bradford 储备液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 0 mL

分类
生物测定
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
乙醇 (95%)46.070.333 L31.67 %
磷酸 (88%)980.667 L58.67 %
考马斯亮蓝825.971.16 g1.404 mM
  1. 在合适的容器中加入 0 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.333 L 乙醇 (95%) 加入溶液
  3. 将 0.667 L 磷酸 (88%) 加入溶液
  4. 将 1.16 g 考马斯亮蓝 加入溶液
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

麻醉剂(MS222)溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

麻醉溶液(缓冲 MS222)常用于暂时固定鱼类和两栖动物。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
MS222 (3-氨基苯甲酸乙酯;Sigma-Aldrich A5040)261.291 g3.827 mM
碳酸氢钠84.010.7 g8.332 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1 g MS222(3-氨基苯甲酸乙酯;Sigma-Aldrich A5040) 加入溶液
  3. 将 0.7 g 碳酸氢钠 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 所得 pH 应约为 7.0。置于避光容器中,4°C 可保存长达 1 个月。使用前回温至室温。

5-氟胞嘧啶(5-FC)溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

5-氟胞嘧啶(5-FC)是一种常用的抗真菌剂,可抑制 DNA 和 RNA 合成。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
5-氟胞嘧啶 (5-FC)129.0910 g77.465 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 10 g 5-氟胞嘧啶 (5-FC) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 涡旋。37°C 孵育 2 h,每 15 min 手动混匀直至 5-FC 溶解。过滤溶液并立即使用。或者分装于无菌管中,-20°C 保存。

SSC(Northern 印迹,20x)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

SSC(生理盐水-柠檬酸钠)缓冲液常用作 Northern 印迹中的杂交或洗涤缓冲液。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.44175.3 g3 M
柠檬酸三钠258.0777.4 g299.919 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 175.3 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 77.4 g 柠檬酸三钠 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 用 氢氧化钠 或 盐酸 将 pH 调至 7.0。高压灭菌,室温保存。可保存 1 年或更久。

SSPE(印迹,20x,pH 7.4)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定
pH
pH 7.4

SSPE(生理盐水-磷酸钠-EDTA)用于杂交和细菌筛选。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.44175.3 g3 M
一水合磷酸二氢钠137.9927.6 g200.014 mM
EDTA292.247.4 g25.322 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 175.3 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 27.6 g 一水合磷酸二氢钠 加入溶液
  4. 将 7.4 g EDTA (乙二胺四乙酸) 加入溶液
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  6. 用 10 N 氢氧化钠 将 pH 调至 7.4。室温保存。

免疫荧光淬灭液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

淬灭液用于免疫荧光和免疫细胞化学应用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
甘氨酸75.073.75 g49.953 mM
氯化铵53.492.67 g49.916 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 3.75 g 甘氨酸 加入溶液
  3. 将 2.67 g 氯化铵 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 淬灭液可在 ~20°C 下保存数周。

核固红溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

核固红是一种蒽醌染料,用于细胞核染色。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
核固红 (Kernechtrot;C.I. 60760)357.271 g2.799 mM
硫酸铝 (Al₂[SO₄]₃•18H₂O)666.4350 g75.027 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1 g 核固红(Kernechtrot;C.I. 60760) 加入溶液
  3. 将 50 g 硫酸铝 (Al2(SO4)3·18H2O) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 搅拌加热至接近沸腾,然后静置过夜冷却。会有大量不溶性残渣,须倾析并过滤除去。溶液可保存约 1 年;每次使用前可能需过滤。

派洛宁 Y(PY)溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

派洛宁 Y(G)(PY)是一种用于 DNA 染色的染料。PY 具有橙色光谱发射,易于与 FITC 和 7-AAD 区分。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
派洛宁 Y(G) (PY) (Polysciences 公司)302.81 g3.303 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1 g 派洛宁 Y(G)(PY;Polysciences 公司) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 4°C 避光保存。

Mayer's 苏木素明矾染液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
硫酸铝钾 (KAl[SO₄]₂•12H₂O)474.3950 g105.399 mM
苏木素 (C.I. 75290)302.281 g3.308 mM
碘酸钠 (NaIO₃)197.890.1 g505.331 μM
一水合柠檬酸210.141 g4.759 mM
水合氯醛165.450 g302.297 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 50 g 硫酸铝钾 (KAl(SO4)2·12H2O) 加入溶液
  3. 将 1 g 苏木精(C.I. 75290) 加入溶液
  4. 将 0.1 g 碘酸钠 (NaIO3) 加入溶液
  5. 将 1 g 一水合柠檬酸 加入溶液
  6. 将 50 g 水合氯醛 加入溶液
  7. 磁力搅拌器可加速碘酸盐氧化生成的矾、苏木精和氧化苏木精的溶解。
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. Mayer 苏木精通常可保存 1 年,但有些批次仅数月即失效。该溶液可多次重复使用。

氯喹

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

氯喹溶液已被用于去除红细胞结合的免疫球蛋白。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯喹二磷酸盐515.8652 g100.803 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 52 g 氯喹二磷酸盐 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 经 0.22-µm 滤器过滤除菌;将滤液分装于铝箔包裹的管中,-20°C 保存。

溴化乙锭溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

溴化乙锭是凝胶电泳中常用的核酸染料。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
溴化乙锭394.3110 g25.361 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 10 g 溴化乙锭 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 磁力搅拌数小时以确保染料完全溶解。将容器用铝箔包裹,或将 10 mg/mL 溶液转入棕色瓶,室温保存。

甲酚红溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
生物测定

甲酚红用作琼脂糖凝胶电泳中 DNA/RNA 以及聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质的示踪染料。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
甲酚红钠盐 (Aldrich)404.414000 g9.891 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 4000 g 甲酚红钠盐(Aldrich) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 10 mM 溶液室温保存。

其他 (2 个配方)

碘化钠/亚硫酸钠溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
其他

碘化钠/亚硫酸钠溶液可用作 DNA 回收中的离液盐。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
亚硫酸钠 (Na₂SO₃)126.041 g7.934 mM
碘化钠149.89675 g4.503 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1 g 亚硫酸钠 (Na2SO3) 加入溶液
  3. 将 675 g 碘化钠 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 将溶液经 Whatman 滤纸过滤,立即使用。

二硫苏糖醇(DTT)(1 M)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
其他
浓度
1 M

DTT(二硫苏糖醇)是一种常用的还原剂。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
DTT (DL-二硫苏糖醇,无水,分子量 = 154.25)154.25150 g972.447 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 150 g DTT(DL-二硫苏糖醇,无水,分子量 154.25) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 分装为 1-mL 等份,铝箔包裹避光,于 -20°C 保存(可长期)。切勿对 DTT 或含 DTT 的溶液进行高压灭菌。

细胞/培养/生长培养基 (11 个配方)

Bath 溶液(无 Ca2+/Mg2+)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氢氧化钾56.1067.854 g139.985 mM
HEPES238.34.766 g20 mM
氯化钾74.550.1491 g2 mM
EGTA380.351.902 g5.001 mM
甲磺酸96.1113.314 g138.529 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 7.854 g 氢氧化钾 加入溶液
  3. 将 4.766 g HEPES 加入溶液
  4. 将 0.1491 g 氯化钾 加入溶液
  5. 将 1.902 g EGTA (乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸) 加入溶液
  6. 将 13.314 g 甲磺酸 加入溶液
  7. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  8. 用甲磺酸将 pH 调至 7.1–7.2。室温(22°C–24°C)下可保存长达 3 年。

改良 Barth 盐水(MBS)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基

改良 Barth 盐水(MBS)常用作非洲爪蟾卵母细胞的培养基。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
HEPES238.311.92 g50.021 mM
氯化钠58.4451.43 g880.048 mM
氯化钾74.550.75 g10.06 mM
碳酸氢钠84.012.1 g24.997 mM
七水合硫酸镁246.472.46 g9.981 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 11.92 g HEPES 加入溶液
  3. 将 51.43 g 氯化钠 加入溶液
  4. 将 0.75 g 氯化钾 加入溶液
  5. 将 2.1 g 碳酸氢钠 加入溶液
  6. 将 2.46 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  7. 用 10 M 氢氧化钠 将 10x MBS 盐溶液 pH 调至 7.8,并高压灭菌。室温下可无限期保存。
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. 配制 1x MBS:将 100 mL 10x MBS 盐溶液和 7 mL 0.1 M CaCl2 与 893 mL 高压灭菌去离子水混合。加入抗生素。于 16°C–18°C(与卵母细胞孵育相同温度)可保存 1–2 个月。使用前检查。

氯化钙储备液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基

氯化钙是一种常用的钙盐,用于多种应用。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钙110.9858 g522.617 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 58 g 氯化钙 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 用渗透仪测定渗透压:若低于 1000 mmol/kg,加入更多 CaCl2;若高于 1000,加入 H2O。(1000 mmol/kg 的渗透压约为 0.383 M。配制该校准溶液是必要的,因为氯化钙具吸湿性,无法可靠地按重量称量。钙浓度的微小误差会对突触生理产生显著影响。)溶液于 4°C 保存。在此条件下保存的溶液似乎可稳定数月。

酵母双杂交(Y2H)培养基,氨基酸缺陷混合料

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基

氨基酸缺陷混合物含有酵母生长所需的氨基酸补充剂。这种氨基酸缺陷混合物适用于酵母双杂交系统。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
腺嘌呤135.130.01 g74.003 μM
L-精氨酸174.20.05 g287.026 μM
L-天冬氨酸133.10.08 g601.052 μM
L-组氨酸155.150.02 g128.908 μM
L-异亮氨酸131.170.05 g381.185 μM
L-亮氨酸131.170.1 g762.369 μM
L-赖氨酸146.190.05 g342.021 μM
L-甲硫氨酸149.210.02 g134.039 μM
L-苯丙氨酸165.190.05 g302.682 μM
L-苏氨酸119.120.1 g839.49 μM
L-色氨酸204.230.05 g244.822 μM
L-酪氨酸181.190.05 g275.953 μM
L-缬氨酸117.150.14 g1.195 mM
尿嘧啶112.090.02 g178.428 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.01 g 腺嘌呤 加入溶液
  3. 将 0.05 g L-精氨酸 加入溶液
  4. 将 0.08 g L-天冬氨酸 加入溶液
  5. 将 0.02 g L-组氨酸 加入溶液
  6. 将 0.05 g L-异亮氨酸 加入溶液
  7. 将 0.1 g L-亮氨酸 加入溶液
  8. 将 0.05 g L-赖氨酸 加入溶液
  9. 将 0.02 g L-蛋氨酸 加入溶液
  10. 将 0.05 g L-苯丙氨酸 加入溶液
  11. 将 0.1 g L-苏氨酸 加入溶液
  12. 将 0.05 g L-色氨酸 加入溶液
  13. 将 0.05 g L-酪氨酸 加入溶液
  14. 将 0.14 g L-缬氨酸 加入溶液
  15. 将 0.02 g 尿嘧啶 加入溶液
  16. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  17. 将相应组分混合,置于密封容器中。省略所需的缺陷型组分。单倍体酵母需要单一缺陷(-Trp=-T 或 -Leu=-L);二倍体酵母需要双缺陷(-Leu -Trp=-LT);筛选互作则需要三缺陷(-Leu-Trp -His=-LTH,另加 3-AT)。

消化培养基

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.4423.4 g400.411 mM
六水合氯化镁203.326.4 g129.857 mM
七水合硫酸镁246.475.4 g21.909 mM
氯化钾74.5511.9 g159.624 mM
氯化钙110.980.3 g2.703 mM
2-(N-吗啉基)乙磺酸195.241.95 g9.988 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 23.4 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 26.4 g 六水合氯化镁 加入溶液
  4. 将 5.4 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  5. 将 11.9 g 氯化钾 加入溶液
  6. 将 0.3 g 氯化钙 加入溶液
  7. 将 1.95 g 2-(N-吗啉基)乙磺酸 (MES) 加入溶液
  8. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  9. 将 pH 调至 6.5。经 0.2-µm 滤膜过滤,4°C 保存。临用前,加入 1% (w/v) 纤维素(Sigma)和 3 U/mL 海藻酸裂解酶(Boyen 等,1990)。

螯合培养基

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.4440.9 g699.863 mM
六水合氯化镁203.36.1 g30.005 mM
七水合硫酸镁246.477.39 g29.983 mM
氯化钾74.551.49 g19.987 mM
EGTA380.357.6 g19.982 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 40.9 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 6.1 g 六水合氯化镁 加入溶液
  4. 将 7.39 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  5. 将 1.49 g 氯化钾 加入溶液
  6. 将 7.6 g EGTA (乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸) 加入溶液
  7. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  8. 用 盐酸 将 pH 调至 5.5。高压灭菌或经 0.2-µm 滤膜过滤。4°C 保存。

青霉素/链霉素/氯霉素抗生素混合液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
青霉素 G356.3710 g28.061 mM
链霉素728.695 g6.862 mM
氯霉素323.131 g3.095 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 10 g 青霉素 G 加入溶液
  3. 将 5 g 链霉素 加入溶液
  4. 将 1 g 氯霉素 加入溶液
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  6. 经 0.22-µm 滤膜过滤,分装为 5-mL 等份,~20°C 保存。使用时,向 1 L Provasoli 强化海水(PES)中加入 5 mL 抗生素混合液。

胚胎培养基

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基

胚胎培养基用于培养胚胎。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
氯化钠58.440.87 g14.887 mM
氯化钾74.550.04 g536.553 μM
二水合氯化钙147.010.15 g1.02 mM
七水合硫酸镁246.470.25 g1.014 mM
磷酸二氢钾136.090.02 g146.962 μM
十二水合磷酸氢二钠358.140.02 g55.844 μM
碳酸氢钠84.010.06 g714.201 μM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 0.87 g 氯化钠 加入溶液
  3. 将 0.04 g 氯化钾 加入溶液
  4. 将 0.15 g 二水合氯化钙 加入溶液
  5. 将 0.25 g 七水合硫酸镁 加入溶液
  6. 将 0.02 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  7. 将 0.02 g 十二水合磷酸氢二钠 加入溶液
  8. 将 0.06 g 碳酸氢钠 加入溶液
  9. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  10. 将 pH 调至 7.0–7.5。

羧苄西林溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基

羧苄西林是一种具有β-内酰胺酶抗性的杀菌抗生素。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
羧苄西林二钠422.3650 g118.382 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 50 g 羧苄西林二钠 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 用 0.22-µm 滤器过滤除菌。分装为 1-mL 等份,~20°C 保存。

M9 基本盐

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
七水合磷酸氢二钠268.0764 g238.744 mM
磷酸二氢钾136.0915 g110.221 mM
氯化钠58.442.5 g42.779 mM
氯化铵53.495 g93.475 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 64 g 七水合磷酸氢二钠 加入溶液
  3. 将 15 g 磷酸二氢钾 加入溶液
  4. 将 2.5 g 氯化钠 加入溶液
  5. 将 5 g 氯化铵 加入溶液
  6. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  7. 将盐溶液分装为 200-mL 等份,于 15 psi(1.05 kg/cm²)液体循环下高压灭菌 15 分钟。

IPTG 溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
细胞/培养/生长培养基

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)是一种合成的乳糖类似物。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
IPTG238.3200 g839.278 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 200 g IPTG (异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 加入溶液
  3. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  4. 经 0.22-µm 一次性滤器过滤除菌。分装为 1-mL 等份,于 -20°C 保存。

凝胶电泳 (8 个配方)

SDS-PAGE SDS 电泳缓冲液(10x)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳

在 SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)中,SDS 电泳缓冲液用作堆叠和分离过程中的电泳缓冲液。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris 碱121.1430.3 g250.124 mM
甘氨酸75.07144.4 g1.924 M
SDS288.3810 g34.676 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 30.3 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  3. 将 144.4 g 甘氨酸 加入溶液
  4. 将 10 g SDS (十二烷基硫酸钠) 加入溶液
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

电泳转移缓冲液(20x)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳

电泳转移缓冲液用于 SDS-PAGE,将蛋白质从凝胶转移到硝酸纤维素膜上。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
柠檬酸三钠258.0735.29 g136.746 mM
磷酸氢二钠 (Na₂HPO₄)141.9622.71 g159.975 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 35.29 g 柠檬酸三钠 加入溶液
  3. 将 22.71 g 磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 将 pH 调至 8.3,高压灭菌,室温下可保存 1–2 年。

Tris-甘氨酸转移缓冲液(20x)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳

Tris-甘氨酸转移缓冲液用作 Western 印迹中的转移缓冲液。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris 碱121.1424.2 g199.769 mM
甘氨酸75.07150.1 g1.999 M
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 24.2 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  3. 将 150.1 g 甘氨酸 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 无需调节 pH(约为 8.8)。室温保存。

碳酸钠转移缓冲液(40x,pH 9.5)

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳
pH
pH 9.5

碳酸钠转移缓冲液用于在 SDS-PAGE 后转移蛋白质。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
碳酸氢钠84.0121.1 g251.161 mM
碳酸钠105.9918.35 g173.13 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 21.1 g 碳酸氢钠 加入溶液
  3. 将 18.35 g 碳酸钠 加入溶液
  4. 用 10 N 氢氧化钠 将 pH 调至 9.5。
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  6. 室温保存。

丙烯酰胺储备液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳

丙烯酰胺与双丙烯酰胺一起用于形成 SDS-PAGE 中使用的凝胶。丙烯酰胺形成聚丙烯酰胺聚合物,而双丙烯酰胺在聚丙烯酰胺链之间交联。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
丙烯酰胺71.08389.6 g5.481 M
双丙烯酰胺154.1710.4 g67.458 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 389.6 g 丙烯酰胺 加入溶液
  3. 将 10.4 g 双丙烯酰胺 (N,N'-亚甲基双丙烯酰胺) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。
  5. 用 Whatman 滤纸过滤储备液,4°C 保存。每隔数周重新配制新鲜的丙烯酰胺储备液。

咪唑-SDS 溶液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
咪唑68.0813.6 g199.765 mM
SDS288.381 g3.468 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 13.6 g 咪唑 加入溶液
  3. 将 1 g SDS (十二烷基硫酸钠) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

电极缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳

电极缓冲液已用于涉及聚合物太阳能电池的研究。

组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
Tris 碱121.1411.6 g95.757 mM
甘氨酸75.0737.5 g499.534 mM
SDS288.383.98 g13.801 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 11.6 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  3. 将 37.5 g 甘氨酸 加入溶液
  4. 将 3.98 g SDS (十二烷基硫酸钠) 加入溶液
  5. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

Tris/EACA 缓冲液

固定配方 · 用量按 1 L 终体积给出 · 起始水量 800 mL

分类
凝胶电泳
组分分子量 (g/mol)用量(每 1 L)浓度
ε-氨基己酸 (EACA)131.171.31 g9.987 mM
Tris 碱121.1410.9 g89.979 mM
  1. 在合适的容器中加入 800 mL 蒸馏水。
  2. 将 1.31 g ε-氨基己酸 (EACA) 加入溶液
  3. 将 10.9 g 三(羟甲基)氨基甲烷 (Tris 碱) 加入溶液
  4. 加入蒸馏水至体积为 1 L。

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